液相色谱一般是由输液泵、检测器、手动进样器或自动进样器、柱温箱、色谱柱等单元组成，是分离化合物必不可少的仪器。其比较精密，在使用中难免出现各种各样的故障，有些故障是由于所选方法不合适引起的, 有些故障是由于日常维护保养不足引起的，这里对可能出现的问题概括总结，供大家参考。

1. 压力不稳

（1）流路中有气泡：流路中产生气泡的原因是由于流动相超声不充分, 配制的流动相没有恢复到室温和过滤头堵塞引起的。流路中有气泡时用0.45um的过滤膜过滤且充分的超声, 特别是用乙腈和水混合的流动相更需充分的超声，当使用两种以上的试剂配制的流动相时，一定要等到流动相恢复到室温才可。

（2）单向阀堵塞：单向阀是输液泵最容易产生故障的部件, 由于经常使用含酸、 碱和盐的流动相, 如果置换流动相的顺序和冲洗方法不当很容易造成单向阀堵塞而引起压力不稳。当单向阀出现堵塞时就要根据流动相的成份是否含有盐而采取不同的处理方法。如果流动相中没有盐就用异丙醇冲洗，边冲洗边观察压力一直冲洗到压力稳定。如果流动相含有盐, 一定要先用水冲洗，然后再用异丙醇冲洗。如果冲洗后压力还是不稳就需把单向阀卸下来进行超声。

（3）密封垫磨损：密封垫在压力作用下长时间与柱塞杆磨擦很容易磨损。解决：密封垫是消耗品不能修复,只能更换。

2. 结果准确性差

（1）手动进样器：手动进样器的定量分为进样针定量和定量环定量。手动进样器引起偏差大的主要原因是进样口漏液、定量环堵、转子密封磨损等3个方面。

如果进样时感觉很费力且废液管有时不出液体，这可能是定量环、转子密封、废液管堵造成的。这时可分别先拆下5口的废液管或定量环，如果进样正常则是废液和定量环堵, 废液管堵时可把废液管进行加热处理。定量环堵时可把定量环连接到输液泵上分别用水和异丙醇冲洗, 必要时可对定量环加热处理。如果拆下5口的废液管或定量环，后进样依旧不正常，就可能是转子密封磨损，转子密封是消耗品如果转子密封磨损只有更换。

（2）自动进样器：分别由进样针、高压阀、低压阀、计量泵和控制系统组成。自动进样器引起偏差大的主要原因是管路有气泡、计量泵吸样不准、进样口漏液、高低压阀转子密封磨等原因引起的。

由管路有气泡：先排气或用异丙醇冲洗, 然后用1个样品瓶装满水且称重,把进样量设定为50uL或100uL单次进样。每进一针称量一次重量是否减少了50ug或100ug, 连续进5针,计算每一针的误差有多大, 如果每一针的误差都很大且没有规律, 则是考虑进样针堵、量泵密封圈磨损、或高低压阀转子密封磨损等原因所致。

进样口漏液：进样口漏液是由于进样针弯曲，针密封磨损，进样针位置错误造成的。进样针弯曲只要不是直角弯或弯曲度不大，只需把进样针卸下来慢慢平直后再装上，然后进行针校正就可以了。如果是针密封磨损引起的进样口漏液只有对其更换。如果进样针位置错误，只许要对针位置进行校准即可。

（3）高低压切换阀: 高低压切换阀是自动进样器切换最频繁的部件, 也是最容易出现故障的部件。其引起偏差大的主要原因是由于转子密封堵或磨损引起的，可卸下转子密封,如果很脏就用异丙醇超声, 如果磨损就需要更换。

（4）计量泵：当螺杆油腻过多阻碍螺杆运行或密封垫磨损时都能引起吸样量不准, 从而导致重现性误差大。可把螺杆拆下清洗或上润滑油，同时对磨损的密封垫进行更换。

3. 保留时间变化

保留时间的变化分为: 波动、 前移和后移。

（1）波动：液相色谱是一套高灵敏的仪器, 温度对它影响很大。仪器不能放置在空调风能直接吹到的地方。同时要尽量远离门口。柱温箱的温度设定要高于室温5℃以上。流动相使用时要恢复到室温, 同时要充分的平衡仪器。

（2）前移：引起保留时间前移的原因主要是流速、温度和混合流动相的比例发生变化。重点检查水相泵的压力和测量流速。如果是温度引起的保留时间前移, 应控制室温或降低柱温箱温度, 如果是水相减少引起的就用水和异丙醇冲洗系统, 超声单向阀或更换密封垫。

（3）后移：保留时间后移主要是流速减少, 温度降低和流动相比例发生变化引起的。应检查温度是否发生变化, 测量总的流速是否减少, 然后再测量有机相泵的流速。

4. 峰形异常

（1）峰拖尾：出现这种情况多数都是由于色谱柱过载引起的，先检查进样量是否过大或样品浓度是否过高，适当减少进样体积和稀释样品浓度把峰高控制在100mAU左右，当出现前延峰时应升高柱温来提高流动相的传质速率。

（2）鬼峰：出现鬼峰的原因主要是流路污染、 流动相的纯度不够、 色谱柱有残留、 溶剂效应、 或平衡时间较短等原因引起的。重新配制流动相, 用新的流动相平衡仪器或用能溶解样品的试剂冲洗液相系统，问题严重时更换色谱柱。

（3）肩峰和分叉峰：肩峰主要是进样量过大和样品浓度过高引起的。所以当出现肩峰时，应减少进样量或稀释样品，降低样品的浓度。当出现分叉峰时应先去掉保护柱再进样，如果问题依旧存在，可能是色谱柱被强保留物质污染，应用适当方法冲洗色谱柱或更换色谱柱。

5. 基线噪声大

基线噪声大是由于流动相中有杂质或有气泡、检测池污染、 氘灯使用时间过长、 光路污染、 电压不稳和仪器接地线不好等原因引起的。检测池污染用异丙醇冲, 洗必要时可卸下检测池的透镜用异丙醇超声。氘灯使用时间过长时应更换新的氘灯, 更换新灯后如果能量值很低应调整光路。如果电压不稳应安装稳压器。仪器要有可靠接地，且零与地线压差不能大于0.5V。